Rekombinantní DNA: Porovnání verzí
Z WikiSkript
(úprava) |
m (+odkazy,+citace, drobnosti) |
||
Řádek 1: | Řádek 1: | ||
*uměle syntetizovaná DNA, která vzniká inzercí | *uměle syntetizovaná [[DNA]], která vzniká inzercí [[gen]]u nebo určité části genu jednoho organismu do [[genom]]u jiného | ||
*Rc-DNA molekuly obsahují úseky DNA rozdílných organismů | *'''Rc-DNA''' molekuly obsahují úseky DNA rozdílných organismů | ||
*vytvářejí se insercí cizorodé DNA do vektoru (= bakteriální plazmid nebo fág) | *vytvářejí se '''insercí cizorodé DNA''' do vektoru (= [[bakterie|bakteriální]] '''plazmid''' nebo fág) | ||
*plazmid E.coli (tzv. pBR322, měří 4362 bp) má vícero restrikčních míst, na kterých se dá kruh DNA otevřít specifickými '''restrikčními endonukleasami''' - to umožňuje, aby se úsek cizorodé DNA, rozštěpené tím stejným | *plazmid ''E. coli'' (tzv. pBR322, měří 4362 bp) má vícero restrikčních míst, na kterých se dá kruh DNA otevřít specifickými '''restrikčními endonukleasami''' - to umožňuje, aby se úsek cizorodé DNA, rozštěpené tím stejným [[enzym]]em, včlenil do plazmidu = rekombinoval a vytvořil tak '''rekombinovaný plazmid''' | ||
*rekombinované plazmidy se znovu vloží do bakterií, které se pak nechají namnožit, pod selekčním tlakem, tak je možné vytvořit klony bakterií, které nesou specificky restrikční fragment cizorodé DNA | *rekombinované plazmidy se znovu vloží do bakterií, které se pak nechají namnožit, pod [[selekce|selekčním]] tlakem, tak je možné vytvořit '''klony bakterií''', které nesou specificky restrikční fragment cizorodé DNA | ||
*příprava rekombinantní DNA začíná pokusem vložit množství více-méně náhodných restrikčních fragmentů do plazmidu, proto je zvlášť rozhodující rozpoznat konkrétní gen, což je možné tehdy, kdy je dostupná příslušná mRNA - ta se purifikuje a použije se na přípravu cDNA pomocí reverzní transkriptasy - výsledkem je radionuklidem značená molekula ''' | *příprava rekombinantní DNA začíná pokusem vložit množství více-méně náhodných restrikčních fragmentů do plazmidu, proto je zvlášť rozhodující rozpoznat konkrétní gen, což je možné tehdy, kdy je dostupná příslušná [[mRNA]] - ta se purifikuje a použije se na přípravu cDNA pomocí reverzní transkriptasy - výsledkem je radionuklidem značená molekula '''cDNA''' = tzv. '''sonda''' („probe“) - za osobitých podmínek se hybridizuje s genem, o který nám jde | ||
*fágy = bakteriální viry, které mohou infikovat bakterii, rozmnožovat se v ní a zapříčinit lýzu bakteriálních buněk - při tom se do prostředí uvolní potomstvo fága, které může infikovat okolí | *fágy = bakteriální [[viry]], které mohou '''infikovat bakterii''', rozmnožovat se v ní a zapříčinit lýzu bakteriálních buněk - při tom se do prostředí uvolní potomstvo fága, které může infikovat okolí | ||
==Odkazy== | |||
===Související články=== | |||
*[[DNA]] | |||
*[[Genetické inženýrství]] | |||
*[[Parasexuální děje u bakterií]] | |||
===Reference=== | |||
{{Citace | |||
|typ = web | |||
|příjmení1 = Štefánek | |||
|jméno1 = Jiří | |||
|název = Medicína, nemoci, studium na 1. LF UK | |||
|url = http://www.stefajir.cz | |||
}} | |||
[[Kategorie:Genetika]] | [[Kategorie:Genetika]] | ||
[[Kategorie:Molekulární biologie]] |
Verze z 19. 3. 2010, 19:56
- uměle syntetizovaná DNA, která vzniká inzercí genu nebo určité části genu jednoho organismu do genomu jiného
- Rc-DNA molekuly obsahují úseky DNA rozdílných organismů
- vytvářejí se insercí cizorodé DNA do vektoru (= bakteriální plazmid nebo fág)
- plazmid E. coli (tzv. pBR322, měří 4362 bp) má vícero restrikčních míst, na kterých se dá kruh DNA otevřít specifickými restrikčními endonukleasami - to umožňuje, aby se úsek cizorodé DNA, rozštěpené tím stejným enzymem, včlenil do plazmidu = rekombinoval a vytvořil tak rekombinovaný plazmid
- rekombinované plazmidy se znovu vloží do bakterií, které se pak nechají namnožit, pod selekčním tlakem, tak je možné vytvořit klony bakterií, které nesou specificky restrikční fragment cizorodé DNA
- příprava rekombinantní DNA začíná pokusem vložit množství více-méně náhodných restrikčních fragmentů do plazmidu, proto je zvlášť rozhodující rozpoznat konkrétní gen, což je možné tehdy, kdy je dostupná příslušná mRNA - ta se purifikuje a použije se na přípravu cDNA pomocí reverzní transkriptasy - výsledkem je radionuklidem značená molekula cDNA = tzv. sonda („probe“) - za osobitých podmínek se hybridizuje s genem, o který nám jde
- fágy = bakteriální viry, které mohou infikovat bakterii, rozmnožovat se v ní a zapříčinit lýzu bakteriálních buněk - při tom se do prostředí uvolní potomstvo fága, které může infikovat okolí
Odkazy
Související články
Reference
Nekompletní citace webu. ŠTEFÁNEK, Jiří. Medicína, nemoci, studium na 1. LF UK [online]. <http://www.stefajir.cz>.