Rekombinantní DNA: Porovnání verzí
Feedback

Z WikiSkript

(úprava)
m (+odkazy,+citace, drobnosti)
Řádek 1: Řádek 1:
*uměle syntetizovaná DNA, která vzniká inzercí genu nebo určité části genu jednoho organismu do genomu jiného
*uměle syntetizovaná [[DNA]], která vzniká inzercí [[gen]]u nebo určité části genu jednoho organismu do [[genom]]u jiného
*Rc-DNA molekuly obsahují úseky DNA rozdílných organismů  
*'''Rc-DNA''' molekuly obsahují úseky DNA rozdílných organismů  
*vytvářejí se insercí cizorodé DNA do vektoru (= bakteriální plazmid nebo fág)
*vytvářejí se '''insercí cizorodé DNA''' do vektoru (= [[bakterie|bakteriální]] '''plazmid''' nebo fág)
*plazmid E.coli (tzv. pBR322, měří 4362 bp) má vícero restrikčních míst, na kterých se dá kruh DNA otevřít specifickými '''restrikčními endonukleasami''' - to umožňuje, aby se úsek cizorodé DNA, rozštěpené tím stejným enzymem, včlenil do plazmidu = rekombinoval a vytvořil tak rekombinovaný plazmid   
*plazmid ''E. coli'' (tzv. pBR322, měří 4362 bp) má vícero restrikčních míst, na kterých se dá kruh DNA otevřít specifickými '''restrikčními endonukleasami''' - to umožňuje, aby se úsek cizorodé DNA, rozštěpené tím stejným [[enzym]]em, včlenil do plazmidu = rekombinoval a vytvořil tak '''rekombinovaný plazmid'''    
*rekombinované plazmidy se znovu vloží do bakterií, které se pak nechají namnožit, pod selekčním tlakem, tak je možné vytvořit klony bakterií, které nesou specificky restrikční fragment cizorodé DNA
*rekombinované plazmidy se znovu vloží do bakterií, které se pak nechají namnožit, pod [[selekce|selekčním]] tlakem, tak je možné vytvořit '''klony bakterií''', které nesou specificky restrikční fragment cizorodé DNA
*příprava rekombinantní DNA začíná pokusem vložit množství více-méně náhodných restrikčních fragmentů do plazmidu, proto je zvlášť rozhodující rozpoznat konkrétní gen, což je možné tehdy, kdy je dostupná příslušná mRNA - ta se purifikuje a použije se na přípravu cDNA pomocí reverzní transkriptasy - výsledkem je radionuklidem značená molekula '''cNDA''' = tzv. '''sonda''' („probe“)- za osobitých podmínek se hybridizuje s genem, o který nám jde
*příprava rekombinantní DNA začíná pokusem vložit množství více-méně náhodných restrikčních fragmentů do plazmidu, proto je zvlášť rozhodující rozpoznat konkrétní gen, což je možné tehdy, kdy je dostupná příslušná [[mRNA]] - ta se purifikuje a použije se na přípravu cDNA pomocí reverzní transkriptasy - výsledkem je radionuklidem značená molekula '''cDNA''' = tzv. '''sonda''' („probe“) - za osobitých podmínek se hybridizuje s genem, o který nám jde
*fágy = bakteriální viry, které mohou infikovat bakterii, rozmnožovat se v ní a zapříčinit lýzu bakteriálních buněk - při tom se do prostředí uvolní potomstvo fága, které může infikovat okolí
*fágy = bakteriální [[viry]], které mohou '''infikovat bakterii''', rozmnožovat se v ní a zapříčinit lýzu bakteriálních buněk - při tom se do prostředí uvolní potomstvo fága, které může infikovat okolí
 
==Odkazy==
===Související články===
*[[DNA]]
*[[Genetické inženýrství]]
*[[Parasexuální děje u bakterií]]
 
===Reference===
{{Citace
|typ = web
|příjmení1 = Štefánek
|jméno1 = Jiří
|název = Medicína, nemoci, studium na 1. LF UK
|url = http://www.stefajir.cz
}}
 
[[Kategorie:Genetika]]
[[Kategorie:Genetika]]
[[Kategorie:Molekulární biologie]]

Verze z 19. 3. 2010, 19:56

  • uměle syntetizovaná DNA, která vzniká inzercí genu nebo určité části genu jednoho organismu do genomu jiného
  • Rc-DNA molekuly obsahují úseky DNA rozdílných organismů
  • vytvářejí se insercí cizorodé DNA do vektoru (= bakteriální plazmid nebo fág)
  • plazmid E. coli (tzv. pBR322, měří 4362 bp) má vícero restrikčních míst, na kterých se dá kruh DNA otevřít specifickými restrikčními endonukleasami - to umožňuje, aby se úsek cizorodé DNA, rozštěpené tím stejným enzymem, včlenil do plazmidu = rekombinoval a vytvořil tak rekombinovaný plazmid
  • rekombinované plazmidy se znovu vloží do bakterií, které se pak nechají namnožit, pod selekčním tlakem, tak je možné vytvořit klony bakterií, které nesou specificky restrikční fragment cizorodé DNA
  • příprava rekombinantní DNA začíná pokusem vložit množství více-méně náhodných restrikčních fragmentů do plazmidu, proto je zvlášť rozhodující rozpoznat konkrétní gen, což je možné tehdy, kdy je dostupná příslušná mRNA - ta se purifikuje a použije se na přípravu cDNA pomocí reverzní transkriptasy - výsledkem je radionuklidem značená molekula cDNA = tzv. sonda („probe“) - za osobitých podmínek se hybridizuje s genem, o který nám jde
  • fágy = bakteriální viry, které mohou infikovat bakterii, rozmnožovat se v ní a zapříčinit lýzu bakteriálních buněk - při tom se do prostředí uvolní potomstvo fága, které může infikovat okolí

Odkazy

Související články

Reference

Nekompletní citace webu. ŠTEFÁNEK, Jiří. Medicína, nemoci, studium na 1. LF UK [online]. <http://www.stefajir.cz>.