Rekombinantní DNA: Porovnání verzí

Aktuální verze z 10. 2. 2021, 17:22

Schéma vzniku rekombinantní DNA v případě plazmidu

Rekombinantní DNA je uměle syntetizovaná DNA, která vzniká inzercí celého genu nebo jeho určité části do genomu jiného organismu. Rekombinantní molekuly (Rc-DNA) tedy obsahují úseky DNA rozdílných organismů. Vytvářejí se inzercí cizorodé DNA do vektoru, kterým může být bakteriální plazmid nebo fág.

Fágy jsou bakteriální viry, které mohou infikovat bakterii, rozmnožovat se v ní a zapříčinit lýzu bakteriálních buněk. Při lýze se do prostředí uvolní potomstvo fága, které může infikovat okolí.

Plazmid E. coli (tzv. pBR322, měří 4361 bp) má více restrikčních míst, na kterých se dá kruh DNA otevřít specifickými restrikčními endonukleasami. To umožňuje, aby se úsek cizorodé DNA, rozštěpené tím stejným enzymem, včlenil do plazmidu = rekombinoval, a vytvořil tak rekombinovaný plazmid. Rekombinované plazmidy se znovu vloží do bakterií, které se pak nechají namnožit, pod selekčním tlakem, tak je možné vytvořit klony bakterií, které nesou specificky restrikční fragment cizorodé DNA.

Příprava rekombinantní DNA začíná pokusem vložit množství víceméně náhodných restrikčních fragmentů do plazmidu, proto je zvlášť rozhodující rozpoznat konkrétní gen, což je možné tehdy, kdy je dostupná příslušná mRNA – ta se purifikuje a použije se na přípravu cDNA pomocí reverzní transkriptasy – výsledkem je radionuklidem značená molekula cDNA = tzv. sonda („probe“) – za osobitých podmínek se hybridizuje s genem, o který nám jde.

Odkazy[upravit | editovat zdroj]

Související články[upravit | editovat zdroj]

Zdroj[upravit | editovat zdroj]

ŠTEFÁNEK, Jiří. Medicína, nemoci, studium na 1. LF UK [online]. [cit. 2009]. <https://www.stefajir.cz/>.


			Článek neobsahuje vše, co by měl.
			Můžete se přidat k jeho autorům a doplnit jej.
			O vhodných změnách se lze poradit v diskusi.

@@ Řádek 1: / Řádek 1: @@
-*uměle syntetizovaná [[DNA]], která vzniká inzercí [[gen]]u nebo určité části genu jednoho organismu do [[genom]]u jiného
+__BEZOBSAHU__
-*'''Rc-DNA''' molekuly obsahují úseky DNA rozdílných organismů
+[[Soubor:Rekombinantní-DNA.png|náhled|400px|Schéma vzniku rekombinantní DNA v případě plazmidu]]
-*vytvářejí se '''insercí cizorodé DNA''' do vektoru (= [[bakterie|bakteriální]] '''plazmid''' nebo fág)
+'''Rekombinantní DNA''' je uměle syntetizovaná [[DNA (nukleová kyselina)|DNA]], která vzniká inzercí celého [[gen]]u nebo jeho určité části do [[genom]]u jiného organismu. Rekombinantní molekuly (Rc-DNA) tedy obsahují úseky DNA rozdílných organismů. Vytvářejí se '''inzercí cizorodé DNA''' do vektoru, kterým může být [[bakterie|bakteriální]] '''plazmid''' nebo fág.
-*plazmid ''E. coli'' (tzv. pBR322, měří 4362 bp) má vícero restrikčních míst, na kterých se dá kruh DNA otevřít specifickými '''restrikčními endonukleasami''' - to umožňuje, aby se úsek cizorodé DNA, rozštěpené tím stejným [[enzym]]em, včlenil do plazmidu = rekombinoval a vytvořil tak '''rekombinovaný plazmid'''
-*rekombinované plazmidy se znovu vloží do bakterií, které se pak nechají namnožit, pod [[selekce|selekčním]] tlakem, tak je možné vytvořit '''klony bakterií''', které nesou specificky restrikční fragment cizorodé DNA
-*příprava rekombinantní DNA začíná pokusem vložit množství více-méně náhodných restrikčních fragmentů do plazmidu, proto je zvlášť rozhodující rozpoznat konkrétní gen, což je možné tehdy, kdy je dostupná příslušná [[mRNA]] - ta se purifikuje a použije se na přípravu cDNA pomocí reverzní transkriptasy - výsledkem je radionuklidem značená molekula '''cDNA''' = tzv. '''sonda''' („probe“) - za osobitých podmínek se hybridizuje s genem, o který nám jde
-*fágy = bakteriální [[viry]], které mohou '''infikovat bakterii''', rozmnožovat se v ní a zapříčinit lýzu bakteriálních buněk - při tom se do prostředí uvolní potomstvo fága, které může infikovat okolí
+'''Fágy''' jsou bakteriální [[viry]], které mohou '''infikovat bakterii''', rozmnožovat se v ní a zapříčinit lýzu bakteriálních buněk. Při lýze se do prostředí uvolní potomstvo fága, které může infikovat okolí.
+Plazmid ''[[Escherichia coli|E. coli]]'' (tzv. pBR322, měří 4361 bp) má více restrikčních míst, na kterých se dá kruh DNA otevřít specifickými '''restrikčními endonukleasami'''. To umožňuje, aby se úsek cizorodé DNA, rozštěpené tím stejným [[enzym]]em, včlenil do [[plazmid]]u = rekombinoval, a vytvořil tak '''rekombinovaný plazmid'''. Rekombinované plazmidy se znovu vloží do bakterií, které se pak nechají namnožit, pod [[selekce|selekčním]] tlakem, tak je možné vytvořit '''klony bakterií''', které nesou specificky restrikční fragment cizorodé DNA.
+'''Příprava rekombinantní DNA''' začíná pokusem vložit množství víceméně náhodných '''restrikčních fragmentů''' do plazmidu, proto je zvlášť rozhodující rozpoznat konkrétní gen, což je možné tehdy, kdy je dostupná '''příslušná''' [[mRNA]] – ta se purifikuje a použije se na přípravu cDNA pomocí [[reverzní transkriptáza|reverzní transkriptasy]] – výsledkem je radionuklidem značená molekula '''cDNA''' = tzv. '''sonda''' („probe“) – za osobitých podmínek se hybridizuje s genem, o který nám jde.
+<noinclude>
 ==Odkazy==
 ===Související články===
-*[[DNA]]
-*[[Genetické inženýrství]]
+*[[DNA (nukleová kyselina)]]
+*[[Genové manipulace a genové inženýrství|Genetické inženýrství]]
 *[[Parasexuální děje u bakterií]]
-===Reference===
+===Zdroj===
-{{Citace
+* {{Citace
 |typ = web
 |příjmení1 = Štefánek
 |jméno1 = Jiří
 |název = Medicína, nemoci, studium na 1. LF UK
-|url = http://www.stefajir.cz
+|url = https://www.stefajir.cz/
+|citováno = 2009
 }}
+</noinclude>
+{{pahýl}}
 [[Kategorie:Genetika]]
 [[Kategorie:Molekulární biologie]]