Barvení ve světelné mikroskopii: Porovnání verzí
Feedback

Z WikiSkript

m (→‎Související články: související článek)
m (odkaz)
 
(Není zobrazeno 28 mezilehlých verzí od 18 dalších uživatelů.)
Řádek 1: Řádek 1:
== Barvení preparátů ==
__TOC__
Při barvení preparátů pro světelnou mikroskopii se vždy jedná o interakci určitého barviva a některé složky tkáně. Různá barviva obarví tkáně v důsledku afinity ke kyselému nebo zásaditému. Podle toho se nazývají '''eozinofilní (acidofilní)''' – pro svou afinitu ke kyselým strukturám v buňkách (např. [[mitochondrie]], [[lyzosomy]], agranulární endoplazmatické retikulum, cytoplazma) a '''bazofilní''' – pro svou afinitu k zásaditým strukturám (např. [[ribozomy]], granulární [[endoplazmatické retikulum]] a [[buněčné jádro]]). Při přehledném barvení získáme '''všeobecné informace''' o preparátu, zatímco selektivní barvení nám v preparátu vyselektuje a označí '''pouze některé struktury'''. Můžeme tak například získat přehled o přítomnosti retikulárních či elastických vláken, určit přítomnost kyselých [[mukopolysacharidy|mukopolysacharidů]] nebo glykogenu. Cílem při barvení preparátů je dosáhnout kontrastu mezi jednotlivými složkami tkáně.
Při barvení preparátů pro světelnou mikroskopii se vždy jedná o interakci určitého barviva a některé složky tkáně. Různá barviva obarví tkáně v důsledku afinity ke kyselému nebo zásaditému. Podle toho se '''bazické struktury''' nazývají '''eozinofilní (acidofilní)''' – např. [[mitochondrie]], [[lyzosomy]], agranulární [[endoplazmatické retikulum]], [[cytoplazma]] a '''kyselé struktury''' nazýváme '''bazofilními ''' např. [[ribozomy]], granulární endoplazmatické retikulum a [[buněčné jádro]] (jsou kyselé protože obsahují genetickou informaci tvořenou nukleovými kyselinami). Barvení dělíme na přehledné a selektivní.Cílem při barvení preparátů je dosáhnout kontrastu mezi jednotlivými složkami tkáně.  


[[Soubor:Barvicí metody.JPG]]
==Přehledné barvení==
== Přehledné barvení ==
Tímto barvením získáme '''všeobecné informace''' o celém preparátu. Mezi barviva přehledného barvení řadíme Hematoxylin-eosin, Wigert van Gieson, Massonovy trichromy a AZAN.
           
[[Soubor:Přehledné barvicí metody.svg|náhled|Přehledné barvicí metody|right|500px]]        
==== Hematoxylin-eosin (HE) ====
*  Nejznámější příklad přehledného barvení; [[hematoxylin]] je bazický, [[eosin]] je kyselé barvivo.
*  Eosin barví cytoplazmu růžově.
*  Hematoxylin barví jádra modrofialově.
* {{Podrobnosti|Barvení hematoxylin-eosin}}
[[Soubor:Ledvina HE - 3 -a.jpg|thumb|Barvení HE − ledvina.]]
==== Weigert van Gieson ====
* jádra jsou nabarvena hnědočerně, vazivo je červené a svalstvo žlutě
==== Massonův trichrom ====
* rozlišujeme tři druhy trichromů podle barvy, kterou se obarví kolagenní vazivo; jádra jsou obarvena většinou hematoxylinem
===== Zelený =====
* jádra jsou nabarvena tmavě modře
* ve vazivu rozlišuje kolagenní vlákna (zelená) a elastická vlákna (fialová)
* cytoplazma buněk je červená
===== Modrý =====
* jádra modročerně
* vazivo modře
=====Žlutý =====
* jádra tmavě modrá
* vazivo je žluté
* cytoplazma červená
==== AZAN ====
* červená jádra
* kolagenní vazivo modré


== Selektivní barvení ==
====Hematoxylin-eosin (HE)====
{{Podrobnosti|Barvení hematoxylin-eosin}}
Jedná se o nejznámější příklad přehledného barvení. [[Hematoxylin]] je bazický, [[eosin]] je kyselé barvivo. Zatímco hematoxylin barví jádra modrofialově, eosin barví cytoplazmu růžově.


Selektivní barvení patří do skupiny '''speciálních''' barviv. Přehled barviv a struktur, které se jimi obarvují:
====Weigert van Gieson====
==== Mucikarmín ====
Toto barvivo barví jádra hnědočerně, vazivo červeně a svalstvo žlutě.
* barví hlen
====Massonův trichrom====
==== Orcein ====
Rozlišujeme tři druhy trichromů podle barvy, kterou se obarví kolagenní vazivo. Jádra jsou většinou obarvena hematoxylinem.
*elastická vlákna (hnědě)
=====Zelený=====
==== Alciánová modř ====  
Ve vazivu rozlišuje kolagenní vlákna (zelená) a elastická vlákna (fialová). Jádra jsou nabarvena hnědě. Cytoplazmu buněk barví zelený Massonův trichrom červeně. Dokážeme také dobře rozeznat i [[erytrocyty]], které barví oranžově.
* pokud je použita v kyselém pH, tak zbarví kyselé mukopolysacharidy (modrá)
==== Bestův karmín ====
* glykogen
==== Szpielmayerův hematoxylin ====
*myelinové pochvy
==== Kongo červeň ====
*amyloid
==== Olejová červeň ====
*neutrální lipidy
==== Sudanová čerň ====
*neutrální lipidy


=====Modrý=====
Modrý trichrom barví vazivo modře a jádra hnědě, protože je zde použitý železitý hematoxylin. Svaly barví červeně.
=====Žlutý=====
Žlutý trichrom barví vazivo do žluté barvy, jádra do barvy tmavě modré. Dobře rozlišíme také cytoplazmu, která se barví tímto barvivem červeně.
====AZAN====
Stejně jako modrý trichrom barví kolagenní vazivo modře (často se tato barviva zaměňují), avšak jádra barví červeně, kvůli použitému azokarmínu.<gallery>
Soubor:Ledvina sběrací kanálek.jpg|'''Hematoxylin-eosin –''' ledvina
Soubor:Hladký sval- Smooth muscle - příčně-transverse.jpeg|'''Weigert Van Gieson –''' močový měchýř
Soubor:Svalová arterie GrT 20x.jpg|'''Zelený trichrom''' '''–''' arterie
Soubor:Varle 15 upr.jpg|'''AZAN''' – varle
</gallery>
==Selektivní barvení==
Selektivní barvení nám v preparátu vyselektuje a označí '''pouze některé struktury'''. Můžeme tak například získat přehled o přítomnosti retikulárních či elastických vláken, určit přítomnost kyselých [[mukopolysacharidy|mukopolysacharidů]] nebo glykogenu.
Selektivní barvení patří do skupiny '''speciálních''' barviv.
Přehled barviv a struktur, které se jimi obarvují:
====Mucikarmín====
Mucikarmín je selektivní barvivo, které dokáže zbarvit hlen.
====Orcein====
Toto barvivo je přírodního původu. Barví elastická vlákna červeno-hnědě.
====Alciánová modř====
Barví kyselé [[mukopolysacharidy]] do modra. Funguje pouze v kyselém pH.
====Bestův karmín====
Toto barvivo se používá k průkazu glykogenu v místě s vysokou koncetrací.
====Szpielmayerův hematoxylin====
Dokáže zbarvit [[myelinizace|myelinové pochvy]].
====Kongo červeň====
Kongo červeň se používá k průkazu [[amyloidóza|amyloidózy]].
====Olejová červeň====
Tímto barvivem dokážeme obarvit neutrální lipidy.
====Sudanová čerň====
Sudanová čerň patří k nejznámějším barvivům, které barví neutrální lipidy.
====Heidenhain====
Výsledkem jsou černé kardiomyocyty.
<noinclude>
<noinclude>


== Odkazy ==
==Odkazy==
=== Související články ===
'''Související články'''
* [[Barvení hematoxylin-eosin]]
* [[Histochemie]]
* [[Principy konvenční histochemie ve světelné mikroskopii]]
* [[Zhotovení histologického preparátu]]


=== Použitá literatura ===
*[[Barvicí metody (1. LF UK)]]
*{{Citace
*[[Barvení hematoxylin-eosin]]
*[[Histochemie]]
*[[Principy konvenční histochemie ve světelné mikroskopii]]
*[[Zhotovení histologického preparátu]]
*[[Cytologická barvení]]
 
'''Použitá literatura'''
* {{Citace
| typ = web
| typ = web
| příjmení1 = Wagner
| příjmení1 = Wagner
Řádek 69: Řádek 75:
}}
}}
*{{Citace
*{{Citace
| typ = kniha
| příjmení1 = Lüllmann-Rauch
| jméno1 = Renate
| titul = Histologie
| vydání = 3
| rok = 2012
| isbn = 978-80-247-3729-4
}}
* {{Citace
| typ = přednáška
| typ = přednáška
| příjmení = Vajner
| příjmení = Vajner
Řádek 81: Řádek 96:
}}
}}
</noinclude>
</noinclude>
[[Kategorie:Histologie]]
[[Kategorie:Histologie]]

Aktuální verze z 6. 12. 2024, 23:52

Při barvení preparátů pro světelnou mikroskopii se vždy jedná o interakci určitého barviva a některé složky tkáně. Různá barviva obarví tkáně v důsledku afinity ke kyselému nebo zásaditému. Podle toho se bazické struktury nazývají eozinofilní (acidofilní) – např. mitochondrie, lyzosomy, agranulární endoplazmatické retikulum, cytoplazma a kyselé struktury nazýváme bazofilními – např. ribozomy, granulární endoplazmatické retikulum a buněčné jádro (jsou kyselé protože obsahují genetickou informaci tvořenou nukleovými kyselinami). Barvení dělíme na přehledné a selektivní.Cílem při barvení preparátů je dosáhnout kontrastu mezi jednotlivými složkami tkáně.

Přehledné barvení[upravit | editovat zdroj]

Tímto barvením získáme všeobecné informace o celém preparátu. Mezi barviva přehledného barvení řadíme Hematoxylin-eosin, Wigert van Gieson, Massonovy trichromy a AZAN.

Přehledné barvicí metody

Hematoxylin-eosin (HE)[upravit | editovat zdroj]

Informace.svg Podrobnější informace naleznete na stránce Barvení hematoxylin-eosin.

Jedná se o nejznámější příklad přehledného barvení. Hematoxylin je bazický, eosin je kyselé barvivo. Zatímco hematoxylin barví jádra modrofialově, eosin barví cytoplazmu růžově.

Weigert van Gieson[upravit | editovat zdroj]

Toto barvivo barví jádra hnědočerně, vazivo červeně a svalstvo žlutě.

Massonův trichrom[upravit | editovat zdroj]

Rozlišujeme tři druhy trichromů podle barvy, kterou se obarví kolagenní vazivo. Jádra jsou většinou obarvena hematoxylinem.

Zelený[upravit | editovat zdroj]

Ve vazivu rozlišuje kolagenní vlákna (zelená) a elastická vlákna (fialová). Jádra jsou nabarvena hnědě. Cytoplazmu buněk barví zelený Massonův trichrom červeně. Dokážeme také dobře rozeznat i erytrocyty, které barví oranžově.

Modrý[upravit | editovat zdroj]

Modrý trichrom barví vazivo modře a jádra hnědě, protože je zde použitý železitý hematoxylin. Svaly barví červeně.

Žlutý[upravit | editovat zdroj]

Žlutý trichrom barví vazivo do žluté barvy, jádra do barvy tmavě modré. Dobře rozlišíme také cytoplazmu, která se barví tímto barvivem červeně.

AZAN[upravit | editovat zdroj]

Stejně jako modrý trichrom barví kolagenní vazivo modře (často se tato barviva zaměňují), avšak jádra barví červeně, kvůli použitému azokarmínu.

Selektivní barvení[upravit | editovat zdroj]

Selektivní barvení nám v preparátu vyselektuje a označí pouze některé struktury. Můžeme tak například získat přehled o přítomnosti retikulárních či elastických vláken, určit přítomnost kyselých mukopolysacharidů nebo glykogenu. Selektivní barvení patří do skupiny speciálních barviv. Přehled barviv a struktur, které se jimi obarvují:

Mucikarmín[upravit | editovat zdroj]

Mucikarmín je selektivní barvivo, které dokáže zbarvit hlen.

Orcein[upravit | editovat zdroj]

Toto barvivo je přírodního původu. Barví elastická vlákna červeno-hnědě.

Alciánová modř[upravit | editovat zdroj]

Barví kyselé mukopolysacharidy do modra. Funguje pouze v kyselém pH.

Bestův karmín[upravit | editovat zdroj]

Toto barvivo se používá k průkazu glykogenu v místě s vysokou koncetrací.

Szpielmayerův hematoxylin[upravit | editovat zdroj]

Dokáže zbarvit myelinové pochvy.

Kongo červeň[upravit | editovat zdroj]

Kongo červeň se používá k průkazu amyloidózy.

Olejová červeň[upravit | editovat zdroj]

Tímto barvivem dokážeme obarvit neutrální lipidy.

Sudanová čerň[upravit | editovat zdroj]

Sudanová čerň patří k nejznámějším barvivům, které barví neutrální lipidy.

Heidenhain[upravit | editovat zdroj]

Výsledkem jsou černé kardiomyocyty.


Odkazy[upravit | editovat zdroj]

Související články

Použitá literatura

  • VAJNER, Luděk. Mikroskopické techniky [přednáška k předmětu Histologie, obor Všeobecné lékařství, 2.lékařská fakulta Univerzita Karlova]. Praha. 21.6.2011.