Amyláza/průkaz makroamylázy: Porovnání verzí
< Amyláza
m (cit) |
m (Vložený článek) |
||
| Řádek 1: | Řádek 1: | ||
<!---------------------------------------------------------------------------------------------------------------- | |||
* VLOŽENÝ ČLÁNEK | |||
* Pozor – tento článek je využíván dalšími články, do kterých je vložen. Buďte prosím opatrní při jeho editaci: | |||
* 1. Nemažte příkazy <noinclude> </noinclude>. Označují části článku, které se při vkládání nepřenášejí. | |||
* 2. Neměňte úrovně použitých nadpisů. Neuvážené použití nadpisů vyšší úrovně by mohlo znepřehlednit jiné články. | |||
* 3. Rozsáhlejší editace, rozšíření či zkrácení článku by mohly narušit koncept dalších článků. Změny projednejte v diskusi. | |||
* Seznam článků, do kterých je tento článek vložen, naleznete v seznamu odkazujících článků pod odkazem „Odkazuje sem“. | |||
* | |||
* Neodstraňujte, prosím, tento komentář. V případě nejasností kontaktujte redakci (redakce@wikiskripta.eu) | |||
* | |||
* Toto upozornění se vkládá šablonou {{subst:Vložený článek}} | |||
-------------------------------------------------------------------------------------------------------------->[[Kategorie:Vložené články]] | |||
Makroamyláza a je příčinou 8–12 % případů hyperamylázemie (zvýšené hodnoty celkové sérové hladiny α-amylázy). Příčinou je makrokomplex enzymu s vysokomolekulárními proteiny séra, především s imunoglobuliny [[IgA]] a [[IgG]]. Obdobný makrokomplex tvoří i další enzymy a to např. pankreatická [[Lipáza makroenzym|lipáza]]. Makroformu α-amylázy lze stanovit [[gelová filtrace|gelovou filtrací]], [[elektroforéza|elektroforeticky]], [[precipitace|precipitací]] s [[PEG]] nebo ELISA technikou. Kvantitativní stanovení poměru makroformy enzymu je nejpřesnější s použitím [[gelová chromatografie|gelové chromatografie]] na [[Sephadex G-100|Sephadexu® G-100]]. Separace probíhá v chlazeném boxu při 10 °C na koloně 9 × 150 mm při průtoku 3 ml/hod 5 hodin. Aktivita α-amylázy je v jednotlivých frakcích stanovena enzymaticky standardním postupem s [[pNP blokovaný maltoheptaosid|pNP blokovaným maltoheptaosidem]] a výsledkem je poměr obou forem enzymu. | Makroamyláza a je příčinou 8–12 % případů hyperamylázemie (zvýšené hodnoty celkové sérové hladiny α-amylázy). Příčinou je makrokomplex enzymu s vysokomolekulárními proteiny séra, především s imunoglobuliny [[IgA]] a [[IgG]]. Obdobný makrokomplex tvoří i další enzymy a to např. pankreatická [[Lipáza makroenzym|lipáza]]. Makroformu α-amylázy lze stanovit [[gelová filtrace|gelovou filtrací]], [[elektroforéza|elektroforeticky]], [[precipitace|precipitací]] s [[PEG]] nebo ELISA technikou. Kvantitativní stanovení poměru makroformy enzymu je nejpřesnější s použitím [[gelová chromatografie|gelové chromatografie]] na [[Sephadex G-100|Sephadexu® G-100]]. Separace probíhá v chlazeném boxu při 10 °C na koloně 9 × 150 mm při průtoku 3 ml/hod 5 hodin. Aktivita α-amylázy je v jednotlivých frakcích stanovena enzymaticky standardním postupem s [[pNP blokovaný maltoheptaosid|pNP blokovaným maltoheptaosidem]] a výsledkem je poměr obou forem enzymu. | ||
Verze z 11. 2. 2011, 17:21
Makroamyláza a je příčinou 8–12 % případů hyperamylázemie (zvýšené hodnoty celkové sérové hladiny α-amylázy). Příčinou je makrokomplex enzymu s vysokomolekulárními proteiny séra, především s imunoglobuliny IgA a IgG. Obdobný makrokomplex tvoří i další enzymy a to např. pankreatická lipáza. Makroformu α-amylázy lze stanovit gelovou filtrací, elektroforeticky, precipitací s PEG nebo ELISA technikou. Kvantitativní stanovení poměru makroformy enzymu je nejpřesnější s použitím gelové chromatografie na Sephadexu® G-100. Separace probíhá v chlazeném boxu při 10 °C na koloně 9 × 150 mm při průtoku 3 ml/hod 5 hodin. Aktivita α-amylázy je v jednotlivých frakcích stanovena enzymaticky standardním postupem s pNP blokovaným maltoheptaosidem a výsledkem je poměr obou forem enzymu.
Důležitým aspektem pro průkaz makroamylázového komplexu je nestabilita komplexu s imunoglobuliny. Při zmražení a rozmražení séra dochází k disociaci komplexů, makroamylázu je proto nutné prokazovat v čerstvě odebraném vzorku séra.
Referenční hodnoty: Makroforma enzymu není za fyziologických podmínek přítomna. Výsledek testu je udáván v procentuálním poměru makroformy amylázy vypočtené z aktivit jednotlivých frakcí. Pozitivní výsledek, průkaz komplexu, je tedy hodnota > 0.
