Barvení ve světelné mikroskopii: Porovnání verzí

Aktuální verze z 6. 12. 2024, 23:52

Při barvení preparátů pro světelnou mikroskopii se vždy jedná o interakci určitého barviva a některé složky tkáně. Různá barviva obarví tkáně v důsledku afinity ke kyselému nebo zásaditému. Podle toho se bazické struktury nazývají eozinofilní (acidofilní) – např. mitochondrie, lyzosomy, agranulární endoplazmatické retikulum, cytoplazma a kyselé struktury nazýváme bazofilními – např. ribozomy, granulární endoplazmatické retikulum a buněčné jádro (jsou kyselé protože obsahují genetickou informaci tvořenou nukleovými kyselinami). Barvení dělíme na přehledné a selektivní.Cílem při barvení preparátů je dosáhnout kontrastu mezi jednotlivými složkami tkáně.

Přehledné barvení[upravit | editovat zdroj]

Tímto barvením získáme všeobecné informace o celém preparátu. Mezi barviva přehledného barvení řadíme Hematoxylin-eosin, Wigert van Gieson, Massonovy trichromy a AZAN.

Přehledné barvicí metody

Hematoxylin-eosin (HE)[upravit | editovat zdroj]

Podrobnější informace naleznete na stránce Barvení hematoxylin-eosin.

Jedná se o nejznámější příklad přehledného barvení. Hematoxylin je bazický, eosin je kyselé barvivo. Zatímco hematoxylin barví jádra modrofialově, eosin barví cytoplazmu růžově.

Weigert van Gieson[upravit | editovat zdroj]

Toto barvivo barví jádra hnědočerně, vazivo červeně a svalstvo žlutě.

Massonův trichrom[upravit | editovat zdroj]

Rozlišujeme tři druhy trichromů podle barvy, kterou se obarví kolagenní vazivo. Jádra jsou většinou obarvena hematoxylinem.

Zelený[upravit | editovat zdroj]

Ve vazivu rozlišuje kolagenní vlákna (zelená) a elastická vlákna (fialová). Jádra jsou nabarvena hnědě. Cytoplazmu buněk barví zelený Massonův trichrom červeně. Dokážeme také dobře rozeznat i erytrocyty, které barví oranžově.

Modrý[upravit | editovat zdroj]

Modrý trichrom barví vazivo modře a jádra hnědě, protože je zde použitý železitý hematoxylin. Svaly barví červeně.

Žlutý[upravit | editovat zdroj]

Žlutý trichrom barví vazivo do žluté barvy, jádra do barvy tmavě modré. Dobře rozlišíme také cytoplazmu, která se barví tímto barvivem červeně.

AZAN[upravit | editovat zdroj]

Stejně jako modrý trichrom barví kolagenní vazivo modře (často se tato barviva zaměňují), avšak jádra barví červeně, kvůli použitému azokarmínu.

Hematoxylin-eosin – ledvina
Weigert Van Gieson – močový měchýř
Zelený trichrom – arterie
AZAN – varle

Selektivní barvení[upravit | editovat zdroj]

Selektivní barvení nám v preparátu vyselektuje a označí pouze některé struktury. Můžeme tak například získat přehled o přítomnosti retikulárních či elastických vláken, určit přítomnost kyselých mukopolysacharidů nebo glykogenu. Selektivní barvení patří do skupiny speciálních barviv. Přehled barviv a struktur, které se jimi obarvují:

Mucikarmín[upravit | editovat zdroj]

Mucikarmín je selektivní barvivo, které dokáže zbarvit hlen.

Orcein[upravit | editovat zdroj]

Toto barvivo je přírodního původu. Barví elastická vlákna červeno-hnědě.

Alciánová modř[upravit | editovat zdroj]

Barví kyselé mukopolysacharidy do modra. Funguje pouze v kyselém pH.

Bestův karmín[upravit | editovat zdroj]

Toto barvivo se používá k průkazu glykogenu v místě s vysokou koncetrací.

Szpielmayerův hematoxylin[upravit | editovat zdroj]

Dokáže zbarvit myelinové pochvy.

Kongo červeň[upravit | editovat zdroj]

Kongo červeň se používá k průkazu amyloidózy.

Olejová červeň[upravit | editovat zdroj]

Tímto barvivem dokážeme obarvit neutrální lipidy.

Sudanová čerň[upravit | editovat zdroj]

Sudanová čerň patří k nejznámějším barvivům, které barví neutrální lipidy.

Heidenhain[upravit | editovat zdroj]

Výsledkem jsou černé kardiomyocyty.

Odkazy[upravit | editovat zdroj]

Související články

Použitá literatura

WAGNER, Filip. Základy barvení [online]. [cit. 2011-10-22]. <http://www.upol.cz/fileadmin/user_upload/LF-kliniky/histologie/studijni_materialy/zaklady_barveni_v_histologii.pdf>.

LÜLLMANN-RAUCH, Renate. Histologie. 3. vydání. 2012. ISBN 978-80-247-3729-4.

VAJNER, Luděk. Mikroskopické techniky [přednáška k předmětu Histologie, obor Všeobecné lékařství, 2.lékařská fakulta Univerzita Karlova]. Praha. 21.6.2011.

@@ Řádek 1: / Řádek 1: @@
-Při barvení preparátů pro světelnou mikroskopii se vždy jedná o interakci určitého barviva a některé složky tkáně. Různá barviva obarví tkáně v důsledku afinity ke kyselému nebo zásaditému. Podle toho se nazývají '''eozinofilní (acidofilní)''' – pro svou afinitu ke bazickým strukturám v buňkách (např. [[mitochondrie]], [[lyzosomy]], agranulární [[endoplazmatické retikulum]], [[cytoplazma]]) a '''bazofilní''' – pro svou afinitu k kyselým strukturám (jsou kyselé protože obsahují genetickou informaci tvořenou nukleovými kyselinami) (např. [[ribozomy]], granulární endoplazmatické retikulum a [[buněčné jádro]]). Barvení dělíme na přehledné a selektivní.Cílem při barvení preparátů je dosáhnout kontrastu mezi jednotlivými složkami tkáně.
+__TOC__
+Při barvení preparátů pro světelnou mikroskopii se vždy jedná o interakci určitého barviva a některé složky tkáně. Různá barviva obarví tkáně v důsledku afinity ke kyselému nebo zásaditému. Podle toho se '''bazické struktury''' nazývají '''eozinofilní (acidofilní)''' – např. [[mitochondrie]], [[lyzosomy]], agranulární [[endoplazmatické retikulum]], [[cytoplazma]] a '''kyselé struktury''' nazýváme '''bazofilními –''' např. [[ribozomy]], granulární endoplazmatické retikulum a [[buněčné jádro]] (jsou kyselé protože obsahují genetickou informaci tvořenou nukleovými kyselinami). Barvení dělíme na přehledné a selektivní.Cílem při barvení preparátů je dosáhnout kontrastu mezi jednotlivými složkami tkáně.
 ==Přehledné barvení==
 Tímto barvením získáme '''všeobecné informace''' o celém preparátu. Mezi barviva přehledného barvení řadíme Hematoxylin-eosin, Wigert van Gieson, Massonovy trichromy a AZAN.
+[[Soubor:Přehledné barvicí metody.svg|náhled|Přehledné barvicí metody|right|500px]]
-[[Soubor:Barvicí metody.JPG]]
 ====Hematoxylin-eosin (HE)====
-[[Soubor:Ledvina HE - 3 -a.jpg|thumb|Barvení HE − ledvina]]
+{{Podrobnosti|Barvení hematoxylin-eosin}}
 Jedná se o nejznámější příklad přehledného barvení. [[Hematoxylin]] je bazický, [[eosin]] je kyselé barvivo. Zatímco hematoxylin barví jádra modrofialově, eosin barví cytoplazmu růžově.
-*{{Podrobnosti|Barvení hematoxylin-eosin}}
 ====Weigert van Gieson====
@@ Řádek 25: / Řádek 23: @@
 ====AZAN====
-Stejně jako modrý trichrom barví kolagenní vazivo modře (často se tato barviva zaměňují), avšak jádra barví červeně, kvůli použitému azokarmínu.
+Stejně jako modrý trichrom barví kolagenní vazivo modře (často se tato barviva zaměňují), avšak jádra barví červeně, kvůli použitému azokarmínu.<gallery>
+Soubor:Ledvina sběrací kanálek.jpg|'''Hematoxylin-eosin –''' ledvina
+Soubor:Hladký sval- Smooth muscle - příčně-transverse.jpeg|'''Weigert Van Gieson –''' močový měchýř
+Soubor:Svalová arterie GrT 20x.jpg|'''Zelený trichrom''' '''–''' arterie
+Soubor:Varle 15 upr.jpg|'''AZAN''' – varle
+</gallery>
 ==Selektivní barvení==
@@ Řádek 36: / Řádek 39: @@
 Toto barvivo je přírodního původu. Barví elastická vlákna červeno-hnědě.
 ====Alciánová modř====
-[[Soubor:Glandula sublingualis.jpg|náhled|300px|Barvení Alciánovou modří a Azokarmínem]]
 Barví kyselé [[mukopolysacharidy]] do modra. Funguje pouze v kyselém pH.
 ====Bestův karmín====
@@ Řádek 50: / Řádek 52: @@
 ====Heidenhain====
-Výsledkem jsou černé kardiomyocyty.<noinclude>
+Výsledkem jsou černé kardiomyocyty.
+<noinclude>
 ==Odkazy==
@@ Řádek 60: / Řádek 63: @@
 *[[Principy konvenční histochemie ve světelné mikroskopii]]
 *[[Zhotovení histologického preparátu]]
+*[[Cytologická barvení]]
 '''Použitá literatura'''
 * {{Citace
 | typ = web
@@ Řádek 71: / Řádek 74: @@
 | citováno = 2011-10-22
 }}
 *{{Citace
 | typ = kniha
@@ Řádek 81: / Řádek 83: @@
 | isbn = 978-80-247-3729-4
 }}
 * {{Citace
 | typ = přednáška
@@ Řádek 96: / Řádek 96: @@
 }}
 </noinclude>
 [[Kategorie:Histologie]]