Barvení ve světelné mikroskopii: Porovnání verzí
Feedback

Z WikiSkript

m (Editace uživatele „62.245.107.186“ (diskuse) vráceny do předchozího stavu, jehož autorem je „Cemnotar“)
m (odkaz)
 
(Není zobrazeno 33 mezilehlých verzí od 22 dalších uživatelů.)
Řádek 1: Řádek 1:
== Barvení preparátů ==
__TOC__
Při barvení preparátů pro světelnou mikroskopii se vždy jedná o interakci určitého barviva a některé složky tkáně. Různá barviva obarví tkáně v důsledku afinity ke kyselému nebo zásaditému. Podle toho se '''bazické struktury''' nazývají '''eozinofilní (acidofilní)''' – např. [[mitochondrie]], [[lyzosomy]], agranulární [[endoplazmatické retikulum]], [[cytoplazma]] a '''kyselé struktury''' nazýváme '''bazofilními –''' např. [[ribozomy]], granulární endoplazmatické retikulum a [[buněčné jádro]] (jsou kyselé protože obsahují genetickou informaci tvořenou nukleovými kyselinami). Barvení dělíme na přehledné a selektivní.Cílem při barvení preparátů je dosáhnout kontrastu mezi jednotlivými složkami tkáně.


==Přehledné barvení==
Tímto barvením získáme '''všeobecné informace''' o celém preparátu. Mezi barviva přehledného barvení řadíme Hematoxylin-eosin, Wigert van Gieson, Massonovy trichromy a AZAN.
[[Soubor:Přehledné barvicí metody.svg|náhled|Přehledné barvicí metody|right|500px]]       


Při barvení preparátů pro světelnou mikroskopii se vždy jedná o interakci určitého barviva a některé složky tkáně. Různá barviva obarví tkáně v důsledku afinity ke kyselému nebo zásaditému. Podle toho se nazývají '''eozinofilní (acidofilní)''' – pro svou afinitu ke kyselým strukturám v buňkách (např. mitochondrie, lyzosomy) a '''bazofilní''' – pro svou afinitu k zásaditým strukturám (např. ribozomy, granulární endoplazmatické retikulum a buněčné jádro). Při přehledném barvení získáme '''všeobecné informace''' o preparátu, zatímco selektivní barvení nám v preparátu vyselektuje a označí '''pouze některé struktury'''. Můžeme tak například získat přehled o přítomnosti retikulárních či elastických vláken, určit přítomnost kyselých [[mukopolysacharidy|mukopolysacharidů]] nebo glykogenu. Cílem při barvení preparátů je dosáhnout kontrastu mezi jednotlivými složkami tkáně.
====Hematoxylin-eosin (HE)====
{{Podrobnosti|Barvení hematoxylin-eosin}}
Jedná se o nejznámější příklad přehledného barvení. [[Hematoxylin]] je bazický, [[eosin]] je kyselé barvivo. Zatímco hematoxylin barví jádra modrofialově, eosin barví cytoplazmu růžově.


== Přehledné barvení ==
====Weigert van Gieson====
           
Toto barvivo barví jádra hnědočerně, vazivo červeně a svalstvo žlutě.
==== Hematoxylin-eosin (HE) ====
====Massonův trichrom====
*  Nejznámější příklad přehledného barvení; hematoxylin je bazický, eosin je kyselé barvivo.
Rozlišujeme tři druhy trichromů podle barvy, kterou se obarví kolagenní vazivo. Jádra jsou většinou obarvena hematoxylinem.
*  Eosin barví cytoplazmu růžově.
=====Zelený=====
*  Hematoxylin barví jádra modrofialově.
Ve vazivu rozlišuje kolagenní vlákna (zelená) a elastická vlákna (fialová). Jádra jsou nabarvena hnědě. Cytoplazmu buněk barví zelený Massonův trichrom červeně. Dokážeme také dobře rozeznat i [[erytrocyty]], které barví oranžově.
* {{Podrobnosti|Barvení hematoxylin-eosin}}
[[Soubor:Ledvina HE - 3 -a.jpg|thumb|Barvení HE − ledvina.]]
==== Weigert van Gieson ====
* jádra jsou nabarvena hnědočerně, vazivo je červené a svalstvo žlutě
==== Massonův trichrom ====
* rozlišujeme tři druhy trichromů podle barvy, kterou se obarví kolagenní vazivo; jádra jsou obarvena většinou hematoxylinem
===== Zelený =====
* jádra jsou nabarvena tmavě modře
* ve vazivu rozlišuje kolagenní vlákna (zelená) a elastická vlákna (fialová)
* cytoplazma buněk je červená
===== Modrý =====
* jádra modročerně
* vazivo modře
=====Žlutý =====
* jádra tmavě modrá
* vazivo je žluté
* cytoplazma červená
==== AZAN ====
* červená jádra
* kolagenní vazivo modré


== Selektivní barvení ==
=====Modrý=====
Modrý trichrom barví vazivo modře a jádra hnědě, protože je zde použitý železitý hematoxylin. Svaly barví červeně.
=====Žlutý=====
Žlutý trichrom barví vazivo do žluté barvy, jádra do barvy tmavě modré. Dobře rozlišíme také cytoplazmu, která se barví tímto barvivem červeně.


Selektivní barvení patří do skupiny '''speciálních''' barviv. Přehled barviv a struktur, které se jimi obarvují:
====AZAN====
==== Mucikarmín ====
Stejně jako modrý trichrom barví kolagenní vazivo modře (často se tato barviva zaměňují), avšak jádra barví červeně, kvůli použitému azokarmínu.<gallery>
* barví hlen
Soubor:Ledvina sběrací kanálek.jpg|'''Hematoxylin-eosin –''' ledvina
==== Orcein ====
Soubor:Hladký sval- Smooth muscle - příčně-transverse.jpeg|'''Weigert Van Gieson –''' močový měchýř
*elastická vlákna (hnědě)
Soubor:Svalová arterie GrT 20x.jpg|'''Zelený trichrom''' '''–''' arterie
==== Alciánová modř ====
Soubor:Varle 15 upr.jpg|'''AZAN''' – varle
* pokud je použita v kyselém pH, tak zbarví kyselé mukopolysacharidy (modrá)
</gallery>
==== Bestův karmín ====
* glykogen
==== Szpielmayerův hematoxylin ====
*myelinové pochvy
==== Kongo červeň ====
*amyloid
==== Olejová červeň ====
*neutrální lipidy
==== Sudanová čerň ====
*neutrální lipidy


==Selektivní barvení==
Selektivní barvení nám v preparátu vyselektuje a označí '''pouze některé struktury'''. Můžeme tak například získat přehled o přítomnosti retikulárních či elastických vláken, určit přítomnost kyselých [[mukopolysacharidy|mukopolysacharidů]] nebo glykogenu.
Selektivní barvení patří do skupiny '''speciálních''' barviv.
Přehled barviv a struktur, které se jimi obarvují:
====Mucikarmín====
Mucikarmín je selektivní barvivo, které dokáže zbarvit hlen.
====Orcein====
Toto barvivo je přírodního původu. Barví elastická vlákna červeno-hnědě.
====Alciánová modř====
Barví kyselé [[mukopolysacharidy]] do modra. Funguje pouze v kyselém pH.
====Bestův karmín====
Toto barvivo se používá k průkazu glykogenu v místě s vysokou koncetrací.
====Szpielmayerův hematoxylin====
Dokáže zbarvit [[myelinizace|myelinové pochvy]].
====Kongo červeň====
Kongo červeň se používá k průkazu [[amyloidóza|amyloidózy]].
====Olejová červeň====
Tímto barvivem dokážeme obarvit neutrální lipidy.
====Sudanová čerň====
Sudanová čerň patří k nejznámějším barvivům, které barví neutrální lipidy.
====Heidenhain====
Výsledkem jsou černé kardiomyocyty.
<noinclude>
<noinclude>


== Odkazy ==
==Odkazy==
=== Související články ===
'''Související články'''
* [[Barvení hematoxylin-eosin]]
 
* [[Histochemie]]
*[[Barvicí metody (1. LF UK)]]
=== Použitá literatura ===
*[[Barvení hematoxylin-eosin]]
*{{Citace
*[[Histochemie]]
*[[Principy konvenční histochemie ve světelné mikroskopii]]
*[[Zhotovení histologického preparátu]]
*[[Cytologická barvení]]
 
'''Použitá literatura'''
* {{Citace
| typ = web
| typ = web
| příjmení1 = Wagner
| příjmení1 = Wagner
Řádek 67: Řádek 75:
}}
}}
*{{Citace
*{{Citace
| typ = kniha
| příjmení1 = Lüllmann-Rauch
| jméno1 = Renate
| titul = Histologie
| vydání = 3
| rok = 2012
| isbn = 978-80-247-3729-4
}}
* {{Citace
| typ = přednáška
| typ = přednáška
| příjmení = Vajner
| příjmení = Vajner
Řádek 79: Řádek 96:
}}
}}
</noinclude>
</noinclude>
[[Kategorie:Histologie]]
[[Kategorie:Histologie]]

Aktuální verze z 6. 12. 2024, 23:52

Při barvení preparátů pro světelnou mikroskopii se vždy jedná o interakci určitého barviva a některé složky tkáně. Různá barviva obarví tkáně v důsledku afinity ke kyselému nebo zásaditému. Podle toho se bazické struktury nazývají eozinofilní (acidofilní) – např. mitochondrie, lyzosomy, agranulární endoplazmatické retikulum, cytoplazma a kyselé struktury nazýváme bazofilními – např. ribozomy, granulární endoplazmatické retikulum a buněčné jádro (jsou kyselé protože obsahují genetickou informaci tvořenou nukleovými kyselinami). Barvení dělíme na přehledné a selektivní.Cílem při barvení preparátů je dosáhnout kontrastu mezi jednotlivými složkami tkáně.

Přehledné barvení[upravit | editovat zdroj]

Tímto barvením získáme všeobecné informace o celém preparátu. Mezi barviva přehledného barvení řadíme Hematoxylin-eosin, Wigert van Gieson, Massonovy trichromy a AZAN.

Přehledné barvicí metody

Hematoxylin-eosin (HE)[upravit | editovat zdroj]

Informace.svg Podrobnější informace naleznete na stránce Barvení hematoxylin-eosin.

Jedná se o nejznámější příklad přehledného barvení. Hematoxylin je bazický, eosin je kyselé barvivo. Zatímco hematoxylin barví jádra modrofialově, eosin barví cytoplazmu růžově.

Weigert van Gieson[upravit | editovat zdroj]

Toto barvivo barví jádra hnědočerně, vazivo červeně a svalstvo žlutě.

Massonův trichrom[upravit | editovat zdroj]

Rozlišujeme tři druhy trichromů podle barvy, kterou se obarví kolagenní vazivo. Jádra jsou většinou obarvena hematoxylinem.

Zelený[upravit | editovat zdroj]

Ve vazivu rozlišuje kolagenní vlákna (zelená) a elastická vlákna (fialová). Jádra jsou nabarvena hnědě. Cytoplazmu buněk barví zelený Massonův trichrom červeně. Dokážeme také dobře rozeznat i erytrocyty, které barví oranžově.

Modrý[upravit | editovat zdroj]

Modrý trichrom barví vazivo modře a jádra hnědě, protože je zde použitý železitý hematoxylin. Svaly barví červeně.

Žlutý[upravit | editovat zdroj]

Žlutý trichrom barví vazivo do žluté barvy, jádra do barvy tmavě modré. Dobře rozlišíme také cytoplazmu, která se barví tímto barvivem červeně.

AZAN[upravit | editovat zdroj]

Stejně jako modrý trichrom barví kolagenní vazivo modře (často se tato barviva zaměňují), avšak jádra barví červeně, kvůli použitému azokarmínu.

Selektivní barvení[upravit | editovat zdroj]

Selektivní barvení nám v preparátu vyselektuje a označí pouze některé struktury. Můžeme tak například získat přehled o přítomnosti retikulárních či elastických vláken, určit přítomnost kyselých mukopolysacharidů nebo glykogenu. Selektivní barvení patří do skupiny speciálních barviv. Přehled barviv a struktur, které se jimi obarvují:

Mucikarmín[upravit | editovat zdroj]

Mucikarmín je selektivní barvivo, které dokáže zbarvit hlen.

Orcein[upravit | editovat zdroj]

Toto barvivo je přírodního původu. Barví elastická vlákna červeno-hnědě.

Alciánová modř[upravit | editovat zdroj]

Barví kyselé mukopolysacharidy do modra. Funguje pouze v kyselém pH.

Bestův karmín[upravit | editovat zdroj]

Toto barvivo se používá k průkazu glykogenu v místě s vysokou koncetrací.

Szpielmayerův hematoxylin[upravit | editovat zdroj]

Dokáže zbarvit myelinové pochvy.

Kongo červeň[upravit | editovat zdroj]

Kongo červeň se používá k průkazu amyloidózy.

Olejová červeň[upravit | editovat zdroj]

Tímto barvivem dokážeme obarvit neutrální lipidy.

Sudanová čerň[upravit | editovat zdroj]

Sudanová čerň patří k nejznámějším barvivům, které barví neutrální lipidy.

Heidenhain[upravit | editovat zdroj]

Výsledkem jsou černé kardiomyocyty.


Odkazy[upravit | editovat zdroj]

Související články

Použitá literatura

  • VAJNER, Luděk. Mikroskopické techniky [přednáška k předmětu Histologie, obor Všeobecné lékařství, 2.lékařská fakulta Univerzita Karlova]. Praha. 21.6.2011.