Barvení ve světelné mikroskopii: Porovnání verzí

Aktuální verze z 6. 12. 2024, 23:52

Při barvení preparátů pro světelnou mikroskopii se vždy jedná o interakci určitého barviva a některé složky tkáně. Různá barviva obarví tkáně v důsledku afinity ke kyselému nebo zásaditému. Podle toho se bazické struktury nazývají eozinofilní (acidofilní) – např. mitochondrie, lyzosomy, agranulární endoplazmatické retikulum, cytoplazma a kyselé struktury nazýváme bazofilními – např. ribozomy, granulární endoplazmatické retikulum a buněčné jádro (jsou kyselé protože obsahují genetickou informaci tvořenou nukleovými kyselinami). Barvení dělíme na přehledné a selektivní.Cílem při barvení preparátů je dosáhnout kontrastu mezi jednotlivými složkami tkáně.

Přehledné barvení[upravit | editovat zdroj]

Tímto barvením získáme všeobecné informace o celém preparátu. Mezi barviva přehledného barvení řadíme Hematoxylin-eosin, Wigert van Gieson, Massonovy trichromy a AZAN.

Přehledné barvicí metody

Hematoxylin-eosin (HE)[upravit | editovat zdroj]

Podrobnější informace naleznete na stránce Barvení hematoxylin-eosin.

Jedná se o nejznámější příklad přehledného barvení. Hematoxylin je bazický, eosin je kyselé barvivo. Zatímco hematoxylin barví jádra modrofialově, eosin barví cytoplazmu růžově.

Weigert van Gieson[upravit | editovat zdroj]

Toto barvivo barví jádra hnědočerně, vazivo červeně a svalstvo žlutě.

Massonův trichrom[upravit | editovat zdroj]

Rozlišujeme tři druhy trichromů podle barvy, kterou se obarví kolagenní vazivo. Jádra jsou většinou obarvena hematoxylinem.

Zelený[upravit | editovat zdroj]

Ve vazivu rozlišuje kolagenní vlákna (zelená) a elastická vlákna (fialová). Jádra jsou nabarvena hnědě. Cytoplazmu buněk barví zelený Massonův trichrom červeně. Dokážeme také dobře rozeznat i erytrocyty, které barví oranžově.

Modrý[upravit | editovat zdroj]

Modrý trichrom barví vazivo modře a jádra hnědě, protože je zde použitý železitý hematoxylin. Svaly barví červeně.

Žlutý[upravit | editovat zdroj]

Žlutý trichrom barví vazivo do žluté barvy, jádra do barvy tmavě modré. Dobře rozlišíme také cytoplazmu, která se barví tímto barvivem červeně.

AZAN[upravit | editovat zdroj]

Stejně jako modrý trichrom barví kolagenní vazivo modře (často se tato barviva zaměňují), avšak jádra barví červeně, kvůli použitému azokarmínu.

Hematoxylin-eosin – ledvina
Weigert Van Gieson – močový měchýř
Zelený trichrom – arterie
AZAN – varle

Selektivní barvení[upravit | editovat zdroj]

Selektivní barvení nám v preparátu vyselektuje a označí pouze některé struktury. Můžeme tak například získat přehled o přítomnosti retikulárních či elastických vláken, určit přítomnost kyselých mukopolysacharidů nebo glykogenu. Selektivní barvení patří do skupiny speciálních barviv. Přehled barviv a struktur, které se jimi obarvují:

Mucikarmín[upravit | editovat zdroj]

Mucikarmín je selektivní barvivo, které dokáže zbarvit hlen.

Orcein[upravit | editovat zdroj]

Toto barvivo je přírodního původu. Barví elastická vlákna červeno-hnědě.

Alciánová modř[upravit | editovat zdroj]

Barví kyselé mukopolysacharidy do modra. Funguje pouze v kyselém pH.

Bestův karmín[upravit | editovat zdroj]

Toto barvivo se používá k průkazu glykogenu v místě s vysokou koncetrací.

Szpielmayerův hematoxylin[upravit | editovat zdroj]

Dokáže zbarvit myelinové pochvy.

Kongo červeň[upravit | editovat zdroj]

Kongo červeň se používá k průkazu amyloidózy.

Olejová červeň[upravit | editovat zdroj]

Tímto barvivem dokážeme obarvit neutrální lipidy.

Sudanová čerň[upravit | editovat zdroj]

Sudanová čerň patří k nejznámějším barvivům, které barví neutrální lipidy.

Heidenhain[upravit | editovat zdroj]

Výsledkem jsou černé kardiomyocyty.

Odkazy[upravit | editovat zdroj]

Související články

Použitá literatura

WAGNER, Filip. Základy barvení [online]. [cit. 2011-10-22]. <http://www.upol.cz/fileadmin/user_upload/LF-kliniky/histologie/studijni_materialy/zaklady_barveni_v_histologii.pdf>.

LÜLLMANN-RAUCH, Renate. Histologie. 3. vydání. 2012. ISBN 978-80-247-3729-4.

VAJNER, Luděk. Mikroskopické techniky [přednáška k předmětu Histologie, obor Všeobecné lékařství, 2.lékařská fakulta Univerzita Karlova]. Praha. 21.6.2011.

@@ Řádek 1: / Řádek 1: @@
-== Barvení preparátů ==
+__TOC__
+Při barvení preparátů pro světelnou mikroskopii se vždy jedná o interakci určitého barviva a některé složky tkáně. Různá barviva obarví tkáně v důsledku afinity ke kyselému nebo zásaditému. Podle toho se '''bazické struktury''' nazývají '''eozinofilní (acidofilní)''' – např. [[mitochondrie]], [[lyzosomy]], agranulární [[endoplazmatické retikulum]], [[cytoplazma]] a '''kyselé struktury''' nazýváme '''bazofilními –''' např. [[ribozomy]], granulární endoplazmatické retikulum a [[buněčné jádro]] (jsou kyselé protože obsahují genetickou informaci tvořenou nukleovými kyselinami). Barvení dělíme na přehledné a selektivní.Cílem při barvení preparátů je dosáhnout kontrastu mezi jednotlivými složkami tkáně.
+==Přehledné barvení==
+Tímto barvením získáme '''všeobecné informace''' o celém preparátu. Mezi barviva přehledného barvení řadíme Hematoxylin-eosin, Wigert van Gieson, Massonovy trichromy a AZAN.
+[[Soubor:Přehledné barvicí metody.svg|náhled|Přehledné barvicí metody|right|500px]]
-Při barvení preparátů pro světelnou mikroskopii se vždy jedná o interakci určitého barviva a některé složky tkáně. Různá barviva obarví tkáně v důsledku afinity ke kyselému nebo zásaditému. Podle toho se nazývají '''eozinofilní (acidofilní)''' - pro svou afinitu ke kyselým strukturám v buňkách (např. mitochondrie, lyzosomy) a '''bazofilní''' – pro svou afinitu k zásaditým strukturám (např. ribozomy, granulární endoplazmatické retikulum a buněčné jádro). Při přehledném barvení získáme '''všeobecné informace''' o preparátu, zatímco selektivní barvení nám v preparátu vyselektuje a označí '''pouze některé struktury'''. Můžeme tak například získat přehled o přítomnosti retikulárních či elastických vláken, určit přítomnost kyselých polymukosacharidů nebo glykogenu. Cílem při barvení preparátů je dosáhnout kontrastu mezi jednotlivými složkami tkáně.
+====Hematoxylin-eosin (HE)====
+{{Podrobnosti|Barvení hematoxylin-eosin}}
+Jedná se o nejznámější příklad přehledného barvení. [[Hematoxylin]] je bazický, [[eosin]] je kyselé barvivo. Zatímco hematoxylin barví jádra modrofialově, eosin barví cytoplazmu růžově.
-== Přehledné barvení ==
+====Weigert van Gieson====
+Toto barvivo barví jádra hnědočerně, vazivo červeně a svalstvo žlutě.
+====Massonův trichrom====
+Rozlišujeme tři druhy trichromů podle barvy, kterou se obarví kolagenní vazivo. Jádra jsou většinou obarvena hematoxylinem.
+=====Zelený=====
+Ve vazivu rozlišuje kolagenní vlákna (zelená) a elastická vlákna (fialová). Jádra jsou nabarvena hnědě. Cytoplazmu buněk barví zelený Massonův trichrom červeně. Dokážeme také dobře rozeznat i [[erytrocyty]], které barví oranžově.
-==== Hematoxylin-eosin (HE) ====
+=====Modrý=====
-*  Nejznámější příklad přehledného barvení; hematoxylin je bazický, eosin je kyselé barvivo.
+Modrý trichrom barví vazivo modře a jádra hnědě, protože je zde použitý železitý hematoxylin. Svaly barví červeně.
-*  Eosin barví cytoplazmu růžově.
+=====Žlutý=====
-*  Hematoxylin barví jádra modrofialově.
+Žlutý trichrom barví vazivo do žluté barvy, jádra do barvy tmavě modré. Dobře rozlišíme také cytoplazmu, která se barví tímto barvivem červeně.
-* {{Podrobnosti|Barvení hematoxylin-eosin}}
-==== Weigert van Gieson ====
+====AZAN====
-* jádra jsou nabarvena hnědočerně, vazivo je červené a svalstvo žlutě
+Stejně jako modrý trichrom barví kolagenní vazivo modře (často se tato barviva zaměňují), avšak jádra barví červeně, kvůli použitému azokarmínu.<gallery>
+Soubor:Ledvina sběrací kanálek.jpg|'''Hematoxylin-eosin –''' ledvina
+Soubor:Hladký sval- Smooth muscle - příčně-transverse.jpeg|'''Weigert Van Gieson –''' močový měchýř
+Soubor:Svalová arterie GrT 20x.jpg|'''Zelený trichrom''' '''–''' arterie
+Soubor:Varle 15 upr.jpg|'''AZAN''' – varle
+</gallery>
-==== Massonův trichrom ====
+==Selektivní barvení==
-* rozlišujeme tři druhy trichromů podle barvy, kterou se obarví kolagenní vazivo; jádra jsou obarvena většinou hematoxylinem
+Selektivní barvení nám v preparátu vyselektuje a označí '''pouze některé struktury'''. Můžeme tak například získat přehled o přítomnosti retikulárních či elastických vláken, určit přítomnost kyselých [[mukopolysacharidy|mukopolysacharidů]] nebo glykogenu.
+Selektivní barvení patří do skupiny '''speciálních''' barviv.
+Přehled barviv a struktur, které se jimi obarvují:
+====Mucikarmín====
+Mucikarmín je selektivní barvivo, které dokáže zbarvit hlen.
+====Orcein====
+Toto barvivo je přírodního původu. Barví elastická vlákna červeno-hnědě.
+====Alciánová modř====
+Barví kyselé [[mukopolysacharidy]] do modra. Funguje pouze v kyselém pH.
+====Bestův karmín====
+Toto barvivo se používá k průkazu glykogenu v místě s vysokou koncetrací.
+====Szpielmayerův hematoxylin====
+Dokáže zbarvit [[myelinizace|myelinové pochvy]].
+====Kongo červeň====
+Kongo červeň se používá k průkazu [[amyloidóza|amyloidózy]].
+====Olejová červeň====
+Tímto barvivem dokážeme obarvit neutrální lipidy.
+====Sudanová čerň====
+Sudanová čerň patří k nejznámějším barvivům, které barví neutrální lipidy.
-===== Zelený =====
+====Heidenhain====
-* jádra jsou nabarvena tmavě modře
+Výsledkem jsou černé kardiomyocyty.
-* ve vazivu rozlišuje kolagenní vlákna (zelená) a elastická vlákna (fialová)
+<noinclude>
-* cytoplazma buněk je červená
-===== Modrý =====
-* jádra modročerně
-* vazivo modře
-=====Žlutý =====
-* jádra tmavě modrá
-* vazivo je žluté
-* cytoplazma červená
-==== AZAN ====
-* červená jádra
-* kolagenní vazivo modré
+==Odkazy==
+'''Související články'''
-== Selektivní barvení ==
+*[[Barvicí metody (1. LF UK)]]
+*[[Barvení hematoxylin-eosin]]
+*[[Histochemie]]
+*[[Principy konvenční histochemie ve světelné mikroskopii]]
+*[[Zhotovení histologického preparátu]]
+*[[Cytologická barvení]]
-Selektivní barvení patří do skupiny speciálních barviv. Přehled barviv a struktur, které se jimi obarvují:
+'''Použitá literatura'''
-==== Mucikarmín ====
+* {{Citace
-* barví hlen
-==== Orcein ====
-*elastická vlákna (hnědě)
-==== Alciánová modř ====
-* pokud je použita v kyselém pH, tak zbarví kyselé mukopolysacharidy (modrá)
-==== Bestův karmín ====
-* glykogen
-==== Szpielmayerův hematoxylin ====
-*myelinové pochvy
-==== Kongo červeň ====
-*amyloid
-==== Olejová červeň ====
-*neutrální lipidy
-==== Sudanová čerň ====
-*neutrální lipidy
-<noinclude>
-== Odkazy ==
-=== Související články ===
-=== Externí odkazy ===
-=== Zdroj ===
-=== Reference ===
-<references />
-=== Použitá literatura ===
-{{Citace
 | typ = web
 | příjmení1 = Wagner
@@ Řádek 75: / Řádek 74: @@
 | citováno = 2011-10-22
 }}
-{{Citace
+*{{Citace
+| typ = kniha
+| příjmení1 = Lüllmann-Rauch
+| jméno1 = Renate
+| titul = Histologie
+| vydání = 3
+| rok = 2012
+| isbn = 978-80-247-3729-4
+}}
+* {{Citace
 | typ = přednáška
 | příjmení = Vajner
@@ Řádek 87: / Řádek 95: @@
 | datum = 21.6.2011
 }}
-=== Doporučená literatura ===
 </noinclude>
 [[Kategorie:Histologie]]