Amyláza/průkaz makroamylázy: Porovnání verzí
Feedback

Z WikiSkript
m (Vložený článek)
m (Robot: kosmetické úpravy)
 
(Nejsou zobrazeny 2 mezilehlé verze od 2 dalších uživatelů.)
Řádek 10: Řádek 10:
*
*
* Toto upozornění se vkládá šablonou {{subst:Vložený článek}}
* Toto upozornění se vkládá šablonou {{subst:Vložený článek}}
-------------------------------------------------------------------------------------------------------------->[[Kategorie:Vložené články]]
-------------------------------------------------------------------------------------------------------------->Makroamyláza a je příčinou 8–12 % případů hyperamylázemie (zvýšené hodnoty celkové sérové hladiny α-amylázy). Příčinou je makrokomplex enzymu s vysokomolekulárními proteiny séra, především s imunoglobuliny [[IgA]] a [[IgG]]. Obdobný makrokomplex tvoří i další enzymy a to např. pankreatická [[Lipáza makroenzym|lipáza]]. Makroformu α-amylázy lze stanovit [[Gelová permeační chromatografie|gelovou filtrací]], [[elektroforéza|elektroforeticky]], [[precipitace|precipitací]] s [[PEG]] nebo ELISA technikou. Kvantitativní stanovení poměru makroformy enzymu je nejpřesnější s použitím [[gelová chromatografie|gelové chromatografie]] na [[Sephadex G-100|Sephadexu® G-100]]. Separace probíhá v chlazeném boxu při 10 °C na koloně 9 × 150 mm při průtoku 3 ml/hod 5 hodin. Aktivita α-amylázy je v jednotlivých frakcích stanovena enzymaticky standardním postupem s [[pNP blokovaný maltoheptaosid|pNP blokovaným maltoheptaosidem]] a výsledkem je poměr obou forem enzymu.  
Makroamyláza a je příčinou 8–12 % případů hyperamylázemie (zvýšené hodnoty celkové sérové hladiny α-amylázy). Příčinou je makrokomplex enzymu s vysokomolekulárními proteiny séra, především s imunoglobuliny [[IgA]] a [[IgG]]. Obdobný makrokomplex tvoří i další enzymy a to např. pankreatická [[Lipáza makroenzym|lipáza]]. Makroformu α-amylázy lze stanovit [[gelová filtrace|gelovou filtrací]], [[elektroforéza|elektroforeticky]], [[precipitace|precipitací]] s [[PEG]] nebo ELISA technikou. Kvantitativní stanovení poměru makroformy enzymu je nejpřesnější s použitím [[gelová chromatografie|gelové chromatografie]] na [[Sephadex G-100|Sephadexu® G-100]]. Separace probíhá v chlazeném boxu při 10 °C na koloně 9 × 150 mm při průtoku 3 ml/hod 5 hodin. Aktivita α-amylázy je v jednotlivých frakcích stanovena enzymaticky standardním postupem s [[pNP blokovaný maltoheptaosid|pNP blokovaným maltoheptaosidem]] a výsledkem je poměr obou forem enzymu.  


Důležitým aspektem pro průkaz makroamylázového komplexu je nestabilita komplexu s imunoglobuliny. Při zmražení a rozmražení séra dochází k disociaci komplexů, makroamylázu je proto nutné prokazovat v čerstvě odebraném vzorku séra.
Důležitým aspektem pro průkaz makroamylázového komplexu je nestabilita komplexu s imunoglobuliny. Při zmražení a rozmražení séra dochází k disociaci komplexů, makroamylázu je proto nutné prokazovat v čerstvě odebraném vzorku séra.
Řádek 21: Řádek 20:
=== Související články ===
=== Související články ===
* [[Amyláza]]
* [[Amyláza]]
=== Zdroj ===
* se svolením autora převzato z {{Citace
| typ = web
| příjmení1 = Kocna
| jméno1 = Petr
| url = http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm
| název = GastroLab
| podnázev = MiniEncyklopedie laboratorních metod v gastroenterologii
| rok = 2002
| datum_revize = 2011-01-08
| citováno = 2011-03-04
}}
</noinclude>
</noinclude>


[[Kategorie:Vložené články]]
[[Kategorie:Biochemie]]
[[Kategorie:Biochemie]]
[[Kategorie:Klinická biochemie]]
[[Kategorie:Klinická biochemie]]
[[Kategorie:Gastroenterologie]]
[[Kategorie:Gastroenterologie]]

Aktuální verze z 29. 11. 2014, 21:39

Makroamyláza a je příčinou 8–12 % případů hyperamylázemie (zvýšené hodnoty celkové sérové hladiny α-amylázy). Příčinou je makrokomplex enzymu s vysokomolekulárními proteiny séra, především s imunoglobuliny IgA a IgG. Obdobný makrokomplex tvoří i další enzymy a to např. pankreatická lipáza. Makroformu α-amylázy lze stanovit gelovou filtrací, elektroforeticky, precipitací s PEG nebo ELISA technikou. Kvantitativní stanovení poměru makroformy enzymu je nejpřesnější s použitím gelové chromatografie na Sephadexu® G-100. Separace probíhá v chlazeném boxu při 10 °C na koloně 9 × 150 mm při průtoku 3 ml/hod 5 hodin. Aktivita α-amylázy je v jednotlivých frakcích stanovena enzymaticky standardním postupem s pNP blokovaným maltoheptaosidem a výsledkem je poměr obou forem enzymu.

Důležitým aspektem pro průkaz makroamylázového komplexu je nestabilita komplexu s imunoglobuliny. Při zmražení a rozmražení séra dochází k disociaci komplexů, makroamylázu je proto nutné prokazovat v čerstvě odebraném vzorku séra.

Referenční hodnoty: Makroforma enzymu není za fyziologických podmínek přítomna. Výsledek testu je udáván v procentuálním poměru makroformy amylázy vypočtené z aktivit jednotlivých frakcí. Pozitivní výsledek, průkaz komplexu, je tedy hodnota > 0.


Odkazy[upravit | editovat zdroj]

Související články[upravit | editovat zdroj]

Zdroj[upravit | editovat zdroj]

  • se svolením autora převzato z KOCNA, Petr. GastroLab : MiniEncyklopedie laboratorních metod v gastroenterologii [online]. ©2002. Poslední revize 2011-01-08, [cit. 2011-03-04]. <http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm>.