Rekombinantní DNA

= uměle syntetizovaná DNA, která vzniká inzercí genu nebo určité části genu jednoho organismu do genomu jiného - Rc-DNA molekuly obsahují úseky DNA rozdílných organismů  vytvářejí se insercí cizorodé DNA do vektoru (= bakteriální plazmid nebo fág)  pro tuto metodu  plazmid E.coli = tzv. pBR322, měří 4362 bp  má vícero restrikčních míst, na kterých se dá kruh DNA otevřít specifickými restrikčními endonukleasami  to umožňuje, aby se úsek cizorodé DNA, rozštěpené tím stejným enzymem, včlenil do plazmidu = rekombinoval  a vytvořil rekombinovaný plazmid - rekombinované plazmidy se znovu vloží do bakterií, které se pak nechají namnožit, pod selekčním tlakem  tak je možné vytvořit klony bakterií, které nesou specificky restrikční fragment cizorodé DNA - příprava rekombinantní DNA začíná pokusem vložit množství více-méně náhodných restrikčních fragmentů do plazmidu, proto je zvlášť rozhodující rozpoznat konkrétní gen, což je možné tehdy, kdy je dostupná příslušná mRNA  ta se purifikuje a použije se na přípravu cDNA pomocí reverzní transkriptasy  výsledkem je radionuklidem značená molekula cNDA = tzv. sonda („probe“)  za osobitých podmínek se hybridizuje s genem, o který nám jde - fágy = bakteriální viry, které mohou infikovat bakterii, rozmnožovat se v ní a zapříčinit lýzu bakteriálních buněk  při tom se do prostředí uvolní potomstvo fága, které může infikovat okolí