Barvení ve světelné mikroskopii

Barvení preparátů

Při barvení preparátů pro světelnou mikroskopii se vždy jedná o interakci určitého barviva a některé složky tkáně. Různá barviva obarví tkáně v důsledku afinity ke kyselému nebo zásaditému. Podle toho se nazývají eozinofilní (acidofilní) - pro svou afinitu ke kyselým strukturám v buňkách (např. mitochondrie, lysosomy) a bazofilní – pro svou afinitu k zásaditým strukturám (např. ribozomy, granulární endoplazmatické retikulum a buněčné jádro). Při přehledném barvení získáme všeobecné informace o preparátu, zatímco selektivní barvení nám v preparátu vyselektuje a označí pouze některé struktury. Můžeme tak například získat přehled o přítomnosti retikulárních či elastických vláken, určit přítomnost kyselých polymukosacharidů nebo glykogenu. Cílem při barvení preparátů je dosáhnout kontrastu mezi jednotlivými složkami tkáně.

Přehledné barvení

Hematoxylin - eosin

• Eosin – nejznámější příklad přehledného barvení; hematoxylin je bazický, eosin je kyselé barvivo
• Eosin barví tkáň růžově
• Hematoxylin barví jádra modře
• Barvení hematoxylin-eosin

Weigert van Gieson

• jádra jsou nabarvena hnědočerně, vazivo je červené a svalstvo žlutě

Massonův trichrom

– rozlišujeme tři druhy trichromů podle barvy, kterou se obarví kolagenní vazivo; jádra jsou obarvena většinou hematoxylinem

Zelený

• jádra jsou nabarvena tmavě modře
• ve vazivu rozlišuje kolagenní vlákna (zelená) a elastická vlákna (fialová)
• cytoplazma buněk je červená

Modrý

• jádra modročerně
• vazivo modře

Žlutý

• jádra tmavě modrá
• vazivo je žluté
• cytoplazma červená

AZAN

• červená jádra
• kolagenní vazivo modré

Selektivní barvení

Selektivní barvení patří do skupiny speciálních barviv. Přehled barviv a struktur, které se jimi obarvují:

Mucikarmín

• barví hlen

Orcein

• elastická vlákna (hnědě)

Alciánová modř

• pokud je použita v kyselém pH, tak se zbarví kyselé mukopolysacharidy (modrá)

Bestův karmín

• glykogen

Szpielmayerův hematoxylin

• myelinové pochvy

Kongo červeň

• amyloid

Olejová červeň

• neutrální lipidy

Sudanová čerň

• neutrální lipidy

Odkazy

Použitá literatura

WAGNER, Filip. Základy barvení [online]. [cit. 2011-10-22]. <http://www.upol.cz/fileadmin/user_upload/LF-kliniky/histologie/studijni_materialy/zaklady_barveni_v_histologii.pdf>.

VAJNER, Luděk. Mikroskopické techniky [přednáška k předmětu Histologie, obor Všeobecné lékařství, 2.lékařská fakulta Univerzita Karlova]. Praha. 21.6.2011.